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本文件介绍了使用Agilent ZORBAX Eclipse Plus C-18色谱柱在三种不同粒径和柱尺寸下（5 µm（4.6 × 150 mm）；快速分辨率（RR），3.5 µm（4.6 × 100 mm），RR高通量（RRHT），1.8-µm（4.6 × 50 mm））对六种B族维生素和维生素C进行反相高效液相色谱分离的方法。采用简单的磷酸盐缓冲液-甲醇流动相梯度。该方法旨在补充美国药典（USP）方法，其中这些维生素单独在不同的柱上通过不同的方法分离，其中一些方法涉及复杂的离子对试剂。较短的柱子提供了更快速的分离，分辨率几乎没有变化。所有化合物可以在1.8-µm柱上分离3.5分钟。当柱长和粒径减小时，灵敏度有所提高。该HPLC方法已应用于各种商业产品中维生素的分析，包括多种维生素和各种软饮料。选择的柱子允许良好的分离，但是RRHT柱也允许快速的方法开发，而不会放弃分辨率和灵敏度。