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本应用笔记介绍了三元和四元梯度在反相色谱中的应用。三元和四元梯度在方法开发中很少使用，但它们可以帮助找到最佳的分离条件。在本应用笔记中，对二元、三元和四元梯度进行了应用和比较。评估了性能数据，包括保留时间的精度和分辨率，结果表明这些梯度是一种有用的工具。