Agilent Comparative Analysis of Control and Breast Cancer Sera Using a Multi-Dimensional Separation Strategy

本文介绍了一种用于减少复杂样品中蛋白质复杂度的多维分离技术。该技术使用高容量多亲和力去除柱来特异性去除六种高丰度蛋白质（白蛋白、IgG、转铁蛋白、血红素蛋白、IgA和抗胰蛋白酶），然后使用宏孔反相C18（mRP-C18）柱对耗竭血清进行分离。在优化的mRP-HPLC条件下，耗竭血清样品的蛋白质回收率超过99％。根据UV痕迹叠加，患者样本之间的重复性非常好。mRP-C18分离的血清样品被进一步通过1D-PAGE和2D-LC-MS/MS进行了分析，结果表明该技术可以成功地降低血清样品的复杂度，并提高低丰度蛋白质的检测灵敏度。